第99回薬剤師国家試験　問114　乳酸脱水素酵素

解答
4

解説
問題文に、「L-乳酸を基質として血清中の本酵素の活性を測定するとき」とあるため、L-乳酸からピルビン酸が生成する反応（L→P）についての方法及び考察について考える必要ある。

１　適切である
L→Pについて調べるためには、血清（被検試料）、L-乳酸（基質）、NAD^＋及び緩衝液から成る反応液を用いる。

２　適切である
被検試料（血清）を含まない反応液を用いた試験も行い、本試験と比較することにより試料以外に起因するLDH活性を補正することができる。

３　適切である
活性測定に用いる緩衝液のpHは、測定の感度をよくするために、最も反応の起こりやすいpHに調節する必要がある。図1より、L→Pの反応が起こりやすいpH（至適pH）は8.5であるため、活性測定に用いる緩衝液のpHを8.5に調整する必要がある。

４　適切でない
L→Pでは、L-乳酸とNAD^＋からピルビン酸、NADH、H^＋が生じる。図2よりNADHは340 nmに吸収極大を示すため、340 nmの吸光度の増加を測定することによって酵素活性を確認する。

５　適切である
心筋にはLDHが存在し、心筋梗塞等の心臓傷害に際してLDHが心細胞内から血液中に漏出する。このことから血清中のLDH活性は心臓傷害の指標となる。